Name: PD0166285
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8148
Rating: 5 (8 reviews)

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Contrôle Qualité

Lot : S814801 DMSO]100 mg/mL]false]Ethanol]100 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Pureté : 99.59%

Cité dans Nature Medicine pour sa qualité supérieure
COA
NMR
SDS
Fiche technique

99.59

Cibles apparentées	CDK HSP PD-1/PD-L1 ROCK DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Aurora Kinase Casein Kinase
Autre Wee1 Inhibiteurs	Adavosertib (AZD1775, MK-1775) Zedoresertib (Debio-0123, WEE1-IN-5) Azenosertib (Zn-C3) Potrasertib

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires	Type dessai	Concentration	Temps dincubation	Description de lactivité	PMID
NIH3T3	Function assay			Inhibition of PDGF-induced autophosphorylation of PDGF-R in NIH3T3 cells, IC50=0.0018μM	9703473
C6	Function assay			Inhibition of PDGF-induced autophosphorylation of PDGF-R in C6 cells, IC50=0.005μM	9703473
MCF-7	Function assay	12 mg/kg		Weight change of MCF-7 tumor cells in mice at 12 mg/kg peroral dose, days 1-15 administration	9703473
C6	Function assay		2 hr	Inhibition of PDGF-stimulated Platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation in C6 rat glioma cells after 2 hr, IC50=0.005μM	9784112
RAVSMCs	Function assay		2 hr	Inhibition of PDGF-stimulated Platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation in rat aortic vascular smooth muscle cells (RAVSMCs) after 2 hr, IC50=0.0065μM	9784112
SW-620	Function assay			Inhibitory activity against SW-620 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.27μM	10956222
HT-29	Function assay			Inhibitory activity against HT-29 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.28μM	10956222
HCT-8	Function assay			Inhibitory activity against HCT-8 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.42μM	10956222
HEK293	Function assay			Binding affinity to human full-length His-tagged Myt1 kinase expressed in HEK293 cells by TR-FRET based binding assay, IC50=0.0072μM	22770610
MDA-MB-231	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human MDA-MB-231 cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.16μM	28792760
HEK293T	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against HEK293T cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.29μM	28792760
MM1S	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human MM1S cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.52μM	28792760
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells	29435139
Rh18	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
Rh41	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB1643 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for A673 cells)	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-12 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for DAOY cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB-EBc1 cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SJ-GBM2 cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-37 cells	29435139
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for U-2 OS cells	29435139
Rh41	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh41 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for RD cells	29435139
Rh18	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh18 cells	29435139
Rh30	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh30 cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Saos-2 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for OHS-50 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-SH cells	29435139
HEK293	qHTS assay			Inhibition of human full length PKMYT1 expressed in HEK293 cells using EFS (247 to 259 residues) as substrate after 1 hr by fluorescence polarization immunoasay, Ki=0.0008μM	29941193
HEK293	qHTS assay			Inhibition of human full length PKMYT1 expressed in HEK293 cells using EFS (247 to 259 residues) as substrate after 1 hr by fluorescence polarization immunoasay, IC50=0.008μM	29941193
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	512.43	Formule	C₂₆H₂₇Cl₂N₅O₂	Stockage (À compter de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	185039-89-8	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant
Synonymes	N/A			Smiles	CCN(CC)CCOC1=CC=C(C=C1)NC2=NC=C3C=C(C(=O)N(C3=N2)C)C4=C(C=CC=C4Cl)Cl

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 100 mg/mL (195.14 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.	2.500mg/ml (4.88mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.	0.500mg/ml (0.98mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 10 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de lajout précédent, est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	Wee1 (Cell-free assay) 24 nM Myt1 (Cell-free assay) 72 nM Chk1 (Cell-free assay) 3.4 μM
In vitro	PD0166285 est identifié pour inhiber l'activité de Wee1 à des concentrations nanomolaires. L'inhibiteur abroge le point de contrôle G2/M induisant une division cellulaire précoce. Au niveau cellulaire, 0,5 μM de ce composé inhibe considérablement la phosphorylation de Cdc2 induite par irradiation au niveau de la Tyr-15 et de la Thr-14 dans sept des sept lignées cellulaires cancéreuses testées. L'abrogation du point de contrôle G2 par cette substance chimique est démontrée pour tuer les cellules cancéreuses. Il n'inhibe pas Cdc2/cyclin B mais inhibe la kinase Chk1 à une concentration beaucoup plus élevée (3433 nM). Le traitement des cellules avec l'inhibiteur est lié à la stabilisation des microtubules et à la diminution de la transcription de la cycline D. Ainsi, ce composé peut être une thérapie anticancéreuse potentiellement utile.
Essai kinase	Criblage de masse Wee1
Essai kinase	Le criblage de masse Wee1 est effectué en utilisant le kit p34cdc2 kinase SPA d'Amersham avec quelques modifications. Brièvement, 45 à 60 nM de Wee1 kinase pleine longueur est incubé avec 25 μM de ce composé, 20 μM d'ATP et 122 à 441 nM de Cdc2/cyclin B dans un volume final de 50 μl de tampon de dilution enzymatique [50 mM Tris (pH 8,0), 10 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT et 0,1 mM Na3VO4]. Après 30 minutes d'incubation à 30 °C, 30 μl de tampon kinase contenant du [33P]ATP [67 mM Tris (pH 8,0), 40 mM NaCl, 13 mM MgCl2, 1 mM DTT et 0,13 mM Na3VO4] contenant 1 μM de peptide biotinylé et 0,25 μCi de [γ-33P]ATP sont ajoutés à la réaction et incubés pendant 30 minutes supplémentaires à 30 °C. La réaction est arrêtée en ajoutant 200 μl de tampon d'arrêt [50 μM ATP, 5 mM EDTA, 0,1 % Triton X-100 et 1,25 mg/ml de billes SPA dans du PBS]. Après centrifugation à 2400 tr/min pendant 15 minutes, la plaque est comptée avec le compteur Microbeta de Wallac.
In vivo	PD0166285 à une concentration de 0,5 μM peut inhiber la phosphorylation de Cdc2Y15/T14 dans toutes les lignées cellulaires testées, indépendamment de leur statut p53 et le ciblage pharmacologique de WEE1 par ce composé sensibilise les tumeurs U251-FM GBM à l'IR in vivo.
Références	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11719452/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17177986/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20832752/

Applications

Méthodes	Biomarqueurs	Images	PMID
Western blot	p-Cdc2 / Cdc2 / Wee1 / Cyclin B		17177986
Immunofluorescence	Wee1 / α-tubulin		17177986

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si vous avez dautres questions, veuillez laisser un message.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PD0166285 Wee1 inhibiteur

Structure chimique

Poids moléculaire: 512.43