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3-Methyladenine (3-MA) Inhibiteur d'Autophagy/PI3K

Réf. CatalogueS2767

La 3-Methyladenine (3-MA) est un inhibiteur sélectif de PI3K pour Vps34 et PI3Kγ avec une IC50 de 25 μM et 60 μM dans les cellules HeLa. Elle bloque de manière consistente la PI3K de classe I, tandis que la suppression de la PI3K de classe III est transitoire, et elle inhibe également la formation d'autophagosome. Les solutions sont instables et doivent être fraîchement préparées.
3-Methyladenine (3-MA) PI3K inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 149.15

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Contrôle Qualité

Lot : Pureté : 99.97%
99.97

Produits souvent utilisés avec 3-Methyladenine (3-MA)

Necrostatin-1 (Nec-1)

It and Necrostatin-1 inhibit cell death of bone marrow macrophages (BMDM) induced by LPS/zVAD and PolyI: C/zVAD.

Z-VAD-FMK

This compound and Z-VAD-FMK combination confirm vital role of programmed cell death in pristimerin-mediated anti-cancer actions.

Ferrostatin-1 (Fer-1)

This compound and Ferrostatin-1 use abolishes acrylamide (ACR)-induced cell death in chondrocytes.

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires Type dessai Concentration Temps dincubation Formulation Description de lactivité PMID
K562 Function Assay 10mM 1h decreases the expression of LC3-II and the formation of autophagosomes 21864037
Jurkat Function Assay 10mM 1h decreases the expression of LC3-II and the formation of autophagosomes 21864037
HeLa  Cytotoxicity Assay 2mM 24h inhibites the cytotoxicity of silibinin to HeLa cells. 21875385
PC12/TetOn Function Assay 0.1/1mM 18h leads to α-syn(WT) accumulation, toxicity, and oligomer formation  21906659
RMPI8226  Function Assay 5mM 1h suppresses the level of autophagy under nutrient depletion 21915620
MCF-7 Function Assay 10mM 48h blocks autophagy induced by bortezomib 21931937
HBx  Apoptosis Assay 10mM 48h DMSO increases cell death 22020078
Marc-145 Function Assay 5mM 12/24/36h reduces the PRRSV titers and the protein expression 22119900
U937 Function Assay 2mM 12h decreases the autophagy ratio  22155150
BGC-823 Function Assay 5mM 2h inhibits the rate of autophagic cells 22322152
A549 Function Assay 0.1mM 24h suppresses SU11274-induced cell death 22466960
pDCs Function Assay 10mM 0.5h  reduces the induction of IFN-α by ssRNA40 22396599
HeLa  Apoptosis Assay 5mM 24h induces caspase-dependent cell death 22545128
U251  Apoptosis Assay 5mM 24h increases S1-induced cell death 22579788
MCF-7  Apoptosis Assay 0.1mM 6h enhances sirtinol-induced apoptosis 22751989
PC-3  Apoptosis Assay 2mM 2h increases ORI-induced cell death 22745580
HCT116 Apoptosis Assay 5mM 24h DMSO enhances apigenin-induced cell death 24626522
U2OS Growth Inhibition Assay 10mM 24h intensifies the growth inhibition induced by Dox 24639013
A2780cp Apoptosis Assay 2.5mM 1h ddH2O enhances cisplatin-induced cell death 24817946
HepG2 Function Assay 5mM 4h increases cellular levels of HL  24713587
Microglia  Apoptosis Assay 5mM 24h decreases hypoxia-induced cell death 24818601
MDA-MB 231 Apoptosis Assay 5mM 0.5h modulates Tocomin® induced apoptosis 24830781
PANC-1  Apoptosis Assay 1mM 48h DMSO enhances bortezomib-induced cell viability loss 24842158
MDA-MB-231 Function Assay 2mM 48h promotes TM-induced cell death 24970676
MDA-MB-231 Function Assay 2mM 24h inhibits autophagy induced by TM  24970676
MCF-7  Function Assay 2mM 48h promotes TM-induced cell death 24970676
MCF-7  Function Assay 2mM 24h inhibits autophagy induced by TM  24970676
HepG2 Apoptosis Assay 3mM 5h reduces cell apoptosis induced by QDs 22836595
HeLa Apoptosis Assay 10mM 2h decreases cell viability co-treatment with PEI 23000135
SK-HEP-1 Apoptosis Assay 10mM 1h protects against autophagy and induces apoptosis in bufalin-treated cells 22858649
MDA-MB231 Function Assay 5mM 1h increases resveratrol-mediated caspase activation and cell death 23088850
PaCa44 Apoptosis Assay 2.5mM 1h reduces genipin-mediated apoptosis 23124112
T-47D Function Assay 10mM 2h inhibits autophagy process and increases rapamycin induced apoptosis 23300026
GTL-16  Apoptosis Assay 5mM 24h reduces cell viability as compared to cells treated with MET inhibitors 23313490
U251MG  Function Assay 3mM 1h suppresses LC3-II protein expression 23338618
T24 Function Assay 10mM 1h reduces the cleavage of LC3 after baicalin treatment 23354080
HUVECs Function Assay 3mM 24h blocks the protective effect of resveratrol by inhibiting autophagy 23358928
MCF-7  Function Assay 5mM 24h inhibits starvation-induced autophagy 23395679
Hela  Function Assay 5mM 24h inhibits starvation-induced autophagy 23395679
OR6 Function Assay 10mM 72h suppresses HCV replication and formation of autophagosomes 23395875
HT-29  Function Assay 1mM 48/96h inhibits AMPK induces autophagic cell death 23508272
SH-SY5Y Cytotoxicity Assay 5mM 24h increases PCN toxicity 23525265
Saos-2  Apoptosis Assay 1mM 96h increases cell death induced by PCX 23563171
1321N1 Cytotoxicity Assay 5mM 24h protects cell against PCN-induced toxicity 23525265
A2780 Apoptosis Assay 5mM 24h converts FTY720 with CDDP into an additive effect towards killing ovarian cancer cells 23592281
OV2008 Apoptosis Assay 5mM 24h converts FTY720 with CDDP into an additive effect towards killing ovarian cancer cells 23592281
PC12  Function Assay 10mM 24h water  inhibits chymotrypsin-like proteasomal activity. 23603979
SH-SY5Y Apoptosis Assay 5mM 1h abolishes celastrol neuroprotective effect 23619395
SH-SY5Y Function Assay 1mM 24h inhibits the autophagy induced by TOCP 23743148
HepG2 Function Assay 10mM 24h inhibits siTIGAR- and HBSS-induced autophagy 23817040
HeLa Function Assay 10mM 2h suppresses LC3 II expressison 23864738
HONE-1  Function Assay 5mM 1h represses 6r-mediated ROS production 23892358
MCF7 Function Assay 5mM 24h increases CuO induced cell death 23962629
HO8910 Apoptosis Assay 10mM 12h enhances B19-induced apoptosi 23983610
SMMC-7721 Apoptosis Assay 5mM 24h attenuates TNF-α protection against serum starvation-mediated apoptosis 24066693
Hep3B Apoptosis Assay 5mM 24h attenuates TNF-α protection against serum starvation-mediated apoptosis 24066693
H460 Function Assay 10mM 4h increases cisplatin-induced cell death 24173208
A549 Function Assay 10mM 4h inhibits autophagy induced by irradiation 24142735
H1299  Function Assay 10mM 4h increases cisplatin-induced cell death 24173208
WiDr Function Assay 10mM 1h inhibits PCBL-induced LC3 II expression 24190489
LoVo  Apoptosis Assay 5mM 48h enhances DCA-induced apoptosis. 24201812
HepG2 E47 Function Assay 2.5mM 48h increases the toxicity of AA, BSO, and CCl4 24273738
RKO Function Assay 2mM 1h DMSO enhances cell death by geldanamycin 24291777
Hep3B Apoptosis Assay 2mM 12h DMSO inhibits AZD8055-induced cell death 24297300
ACHN-5968 Apoptosis Assay 5mM 3h enhances paclitaxel-mediated apoptosis  24305604
Huh7 Apoptosis Assay 2mM 12h DMSO inhibits AZD8055-induced cell death 24297300
UOK257 Apoptosis Assay 5mM 3h enhances paclitaxel-mediated apoptosis  24305604
ECSCs  Apoptosis Assay 10mM 4h decreases rapamycin-treated apoptosis 24319109
MCF-7  Function Assay 10mM 24h inhibits the autophagy induced by chemotherapy drugs 24315578
SGC-7901  Apoptosis Assay 2mM 1h increases CA-4 induced apoptosis 24321340
SMMC-7721 Apoptosis Assay 2mM 1h increases CA-4 induced apoptosis 24321340
T24 Apoptosis Assay 5mM 1.5h potentiates celecoxib-induced apoptosis 24349176
NTUB1 Apoptosis Assay 5mM 1.5h potentiates celecoxib-induced apoptosis 24349176
MG-63 Apoptosis Assay 10mM 12h enhances DP-induced apoptosis 24358301
MG-63 Apoptosis Assay 0.5/1mM 32h enhances salinomycin-induced cell apoptosis 24358342
MG-63 Function Assay 0.5/1mM 48h induces salinomycin-induced cell viability loss 24358342
U2OS  Function Assay 0.5/1mM 48h induces salinomycin-induced cell viability loss 24358342
HGC-27 Function Assay 10mM 1h inhibits the cell viability loss by RAD001 or MK-2206 24416349
HCT116  Apoptosis Assay 5mM 24h enhances the apoptosis induced by apigenin 24626522
A549 Apoptosis Assay 10mM 48h accelerates the reduction of cell viability induced by PTX 24626722
Saos-2 Apoptosis Assay 10mM 24h intensifies the growth inhibition of the U2OS cells induced by Dox 24639013
U2OS Apoptosis Assay 10mM 24h intensifies the growth inhibition of the U2OS cells induced by Dox 24639013
HepG2 Function Assay 5mM 4h increases HL release 24713587
A549 Apoptosis Assay 5mM 48h decreases the percentage of cell death and expression levels of caspase-3, Beclin-1 and LC3-II 24706303
A2780cp Apoptosis Assay 2.5mM 1h ddH2O enhances cisplatin-induced cell death 24817946
Microglia  Apoptosis Assay 5mM 24h decreases hypoxia-induced cell death 24818601
HT-29  Apoptosis Assay 1mM 48h DMSO enhances bortezomib-induced cell viability loss 24842158
MDR Apoptosis Assay 10mM 6h strengthens the power of anticancer drugs 25019701
H157 Function Assay 5mM 2h suppresses SPC induced accumulation of LC3-II 25285628
A549  Function Assay 5mM 2h suppresses SPC induced accumulation of LC3-II 25285628
A2780cp  Growth Inhibition Assay 1mM 1h increases cisplatin-induced cell death 25322694
NBL-W-S  Apoptosis Assay 1mM 6h increases cell apoptosis induced by GANT-61 25323222
NBL-W-S  Growth Inhibition Assay 1mM 6h enhances GANT-61 toxicity 25323222
A549  Apoptosis Assay 5mM 2h DMSO inhibits BDMC-induced apoptotic cell death 25716561
95D Apoptosis Assay 5mM 2h DMSO inhibits BDMC-induced apoptotic cell death 25716561
A549  Growth Inhibition Assay 3mM 2h DMSO reduces growth inhibitory effect of BDMC 25716561
95D Growth Inhibition Assay 3mM 2h DMSO reduces growth inhibitory effect of BDMC 25716561
Nara-H Growth Inhibition Assay 5mM 48h enhances temsirolimusmediated suppression of Nara-H cell proliferation 21805033
HUVECs Function Assay 10mM 0.5h decreases the AGE-BSAinduced autophagy leve 21468592
HepG2 Apoptosis Assay 2mM 1h enhances radiation-induced cell death 21453691
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire 149.15 Formule

C6H7N5

Stockage (À compter de la date de réception) 3 years -20°C powder
N° CAS 5142-23-4 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères Les solutions sont instables. Préparer des solutions fraîches ou acheter des formats petits et préemballés. Reconditionner dès réception.
Synonymes NSC 66389 Smiles CN1C=NC(=N)C2=C1N=CN2

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 10 mg/mL (67.04 mM) Réchauffé avec un bain-marie à 50°C; Ultrasonifié;
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 10 mg/mL

Water : 4 mg/mL

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de lajout précédent, est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC50/Ki
Autophagy
Vps34
(HeLa cells)
25 μM
PI3Kγ
(HeLa cells)
60 μM
In vitro

La légère préférence pour la prévention de Vps34 par la 3-Methyladenine (3-MA) provient probablement d'un cycle hydrophobe spécifique à Vps34, qui entoure le groupe 3-méthyle de ce composé. Il a été rapporté qu'il provoque la mort des cellules cancéreuses dans des conditions normales et de famine, et qu'il pourrait également supprimer la migration et l'invasion cellulaires indépendamment de sa capacité à inhiber l'autophagy, ce qui implique qu'il possède des fonctions autres que la suppression de l'autophagy. Ce composé déclenche une mort cellulaire dépendante de la caspase qui est indépendante de l'inhibition de l'autophagy. Le traitement avec 5 mM de celui-ci réduit le pourcentage de cellules HeLa privées de glucose affichant des points GFP-LC3 à 23 %. Les niveaux de LC3-I augmentent et les niveaux de LC3-II diminuent entre 12 et 48 heures dans les cellules traitées avec 3-MA. La conversion de LC3-I en LC3-II est supprimée par le composé. Le traitement des cellules HeLa avec 2,5 mM ou 5 mM pendant un jour n'affecte pas la viabilité cellulaire, tandis que le traitement avec 10 mM pendant un jour provoque une diminution de 25,0 % de la viabilité cellulaire. Le traitement des cellules avec 2,5, 5 ou 10 mM pendant deux jours entraîne une diminution de la viabilité de 11,5 %, 38,0 % et 79,4 %, respectivement. Il diminue la viabilité cellulaire de manière dépendante du temps et de la dose, et raccourcit significativement la durée de l'arrêt de la prométaphase induit par le nocodazole. La suppression de l'autophagy par le 3-MA inhibe la mort cellulaire induite par le SU11274. Un traitement prolongé avec celui-ci (jusqu'à 9 heures) induit une conversion significative de LC3 I en II dans les MEF de type sauvage. Un traitement prolongé avec le 3-MA, mais pas la wortmannine, augmente nettement la ponctuation/agrégation de GFP-LC3. Sa conversion de LC3 induite et la libération de GFP libre sont dépendantes d'ATG7. Le traitement avec celui-ci conduit à une augmentation évidente du niveau de protéine p62. Le composé augmente le niveau de p62 même dans les MEF Atg5-/-- ainsi que dans les cellules avec délétion d'ATG5 médiatisée par la DOX. Il inhibe les PI3K de classe I et de classe III selon différents schémas temporels. Sa conversion de LC3 I en LC3 II induite est considérablement compromise dans les cellules Tsc2-/-- par rapport aux cellules de type sauvage. Ce composé perturbe la fonction anti-autophagique du complexe mTOR 1.

Essai kinase
Essai de dégradation des protéines
Les cellules HeLa sont radiomarquées pendant 24 heures avec 0,05 mCi/mL de l-[U- 14C]valine. À la fin de la période de marquage, les cellules sont rincées trois fois avec du PBS. Les cellules sont incubées pendant les temps désignés dans un milieu complet ou EBSS avec ou sans la présence de 10 mM de 3-Methyladenine (3-MA).
In vivo

La 3-Methyladenine (3-MA) bloque l'autophagy par son effet sur la phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) de classe III. Le traitement avec ce composé ne modifie pas le degré d'hémorragie par rapport au groupe hémorragie sous-arachnoïdienne (HSA). Son prétraitement aggrave significativement les symptômes neurologiques par rapport au groupe HSA + véhicule. L'autophagy est diminuée lors de son application. Inversement, la caspase-3 clivée est nettement régulée à la hausse dans le groupe HSA + 3-MA. Conformément à la régulation à la hausse de l'expression de la caspase-3 clivée, le nombre de cellules TUNEL-positives dans le cortex droit est significativement augmenté dans le groupe HSA + 3-MA par rapport au groupe HSA + véhicule.

Références
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20123989/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22521819/

Applications

Méthodes Biomarqueurs Images PMID
Western blot α-SMA / TGF-β / LC-3BI / LC-3B II / Beclin-1 / NF-κB p65 caspase-3 / caspase-9 / PARP VEGF APP / BACE1 / ADAM17 / Presenilin 1 / Presenilin 2 / Nicastrin / APH-1 / Pen-2 / LC3-1 / LC3-2
S2767-WB1
29296191
Immunofluorescence LC3 / Hif-α / COX2
S2767-IF1
29039446
Growth inhibition assay Cell viability
S2767-viability
26934124

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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Foire aux questions

Question 1:
I'm also wondering whether it can be dissolved in water, or maybe something like culture medium, normal saline solution to form 10mM solution.

Réponse :
As the reference (http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal. pone.0035665), it was found to inhibit autophagy at concentrations ranging from 1 to 10 mM and was directly dissolved into the culture medium at the indicated concentrations. And we tested the solubility of S2767, and found its solubility in DMEM is 31 mg/mL at about 40°C.